2× Master Mix PCR (бе Ранг)
PCR Master Mix як навъ маҳлули анъанавии пешакии PCR мебошад, ки барои истифода омода аст, аз ҷумла Taq DNA Polymerase, dNTP mix MgCl2 ва буфери оптимизатсияшуда.Ҳангоми реаксия, барои пурқувваткунӣ танҳо праймер ва қолабро илова кардан мумкин аст, ки ин қадамҳои амалиёти таҷрибаро хеле осон мекунад.Ин маҳсулот дорои стабилизаторҳои аъло буда, дар ҳарорати 4℃ барои 3 моҳ нигоҳ дошта мешавад.Маҳсулоти ПТР протрузияи 3′-dA дорад ва ба осонӣ ба вектори Т клон кардан мумкин аст.
Шароити нигоҳдорӣ
Маҳсулот бояд дар -25 ℃ ~ -15 ℃ барои ду сол нигоҳ дошта шавад.
Мушаххасоти
Вафодорӣ (бар зидди Taq) | 1× |
Оғози гарм | No |
Аз ҳад зиёд | 3′-А |
Полимераз | Так ДНК полимераза |
Формати реаксия | SuperMix ё Master Mix |
Суръати реаксия | Стандарт |
Навъи маҳсулот | PCR Master Mix (2×) |
Дастурҳо
1.Системаи реаксия
Компонентхо | Андоза (мкл) |
Шаблон ДНК | Муносиб |
Пример 1 (10 мкмоль/л) | 2 |
Пример 2 (10 мкмоль/л) | 2 |
PCR Master Mix | 25 |
ДД2O | Ба 50 |
2.Протоколи тақвият
Қадамҳои даврӣ | Ҳарорат (°C) | Вақт | Сиклҳо |
Пеш аз денатуратсия | 94 ℃ | 5 дақиқа | 1 |
Денатуратсия | 94 ℃ | 30 сония | 35 |
Табобат | 50-60 ℃ | 30 сония | |
Васеъ | 72 ℃ | 30-60сек/кб | |
Васеъкунии ниҳоӣ | 72 ℃ | 10 дақиқа | 1 |
Эзоҳҳо:
1) Истифодаи Шаблон: 50-200 нг ДНК геномӣ;0,1-10 нг ДНК плазмидӣ.
2) Mg2+консентратсияи: Ин маҳсулот дорои 3 мм MgCl2 барои аксари аксуламалҳои PCR мувофиқ аст.
3) Ҳарорати тозакунӣ: Лутфан ба арзиши назариявии Tm-и Primers муроҷиат кунед.Ҳарорати тозакунӣ метавонад аз арзиши назариявии праймер то 2-5 ℃ пасттар бошад.
4) Вақти тамдид: Барои муайянкунии молекулавӣ 30 сония/кб тавсия дода мешавад.Барои клонкунии ген, 60сек/кб тавсия дода мешавад.
Қайдҳо
1.Барои бехатарӣ ва саломатии худ, лутфан куртаҳои лабораторӣ ва дастпӯшакҳои якдафъаинаро барои амалиёт пӯшед.
2.Танҳо барои истифодаи тадқиқот!