Як қадами Fast RT-qPCR Probe Premix-UNG
Гурба №: HCR5143A
Маҷмӯаи як қадами RT-qPCR (FOR FAST) маҷмӯаи муайянкунии зуд дар асоси зонд аст, ки барои PCR-и миқдорӣ як-плекс ё мултиплекс бо истифода аз РНК ҳамчун қолаб (ба монанди вируси РНК) мувофиқ аст.Ин маҳсулот насли нави бо антитело тағирёфтаи Taq DNA Polymerase ва як қадами бахшидашудаи Транскриптазаи баръаксро бо буфери оптимизатсияшуда барои амплификацияи тез истифода мебарад, ки суръати амплификация тезтар, самаранокии баландтар ва хосият дорад.Он тақвияти мутавозинро ҳам дар як плекс ва ҳам мултиплекси намунаҳои консентратсияи паст ва баланд дар муддати кӯтоҳ дастгирӣ мекунад.
Компонентхо
1. Буфери 5×RT-qPCR (U+)
2. Омехтаи ферментҳо (U+)
Эзоҳҳо:
а.5×RT-qPCR буфери (U+) dNTP ва Mg-ро дар бар мегирад2+;
б.Омехтаи ферментҳо (U+) транскриптазаи баръакс, полимеразаи Hot Start Taq DNA, inhibitor RNase ва UDG-ро дар бар мегирад;
в.Маслиҳатҳои RNase-Free, қубурҳои EP ва ғайраро истифода баред.
Пеш аз истифода буфери 5×RT-qPCR-ро (U+) бодиққат омехта кунед.Агар пас аз обшавӣ ягон боришот вуҷуд дошта бошад, интизор шавед, ки буфер ба ҳарорати хонагӣ баргардад, омехта ва об кунед ва сипас онҳоро ба таври муқаррарӣ истифода баред.
Шароити нигоҳдорӣ
Маҳсулот бо яхи хушк фиристода мешавад ва мумкин аст дар -25 ~ -15 ℃ барои 1 сол нигоҳ дошта шавад.
Дастурҳо
1. Реаксия Система
| Компонентхо | Ҳаҷм (20 мкл реаксия) |
| 2 × буфери RT-qPCR | 4 мкл |
| Омехтаи ферментҳо (U+) | 0,8 мкл |
| Пример ба пеш | 0,1~ 1,0мкМ |
| Баръакс | 0,1~ 1,0мкМ |
| Тафтиши TaqMan | 0,05~0,25мкМ |
| Шаблон | X мкл |
| Оби RNase ройгон | то 25 мкл |
Эзоҳ: Ҳаҷми реаксия 10-50μL аст.
2. Протоколи велосипедронӣ (Сстандарт)
| Сикл қадам | Ҳарорат. | Вақт | Сиклҳо |
| Транскрипсияи баръакс | 55 ℃ | 10 дақиқа | 1 |
| Денатуратсияи ибтидоӣ | 95 ℃ | 30 сония | 1 |
| Денатуратсия | 95 ℃ | 10 сония | 45 |
| Табобат / васеъкунӣ | 60 ℃ | 30 сония |
| Протоколи велосипедронӣ (тез) Сикл қадам |
Ҳарорат. |
Вақт |
Сиклҳо |
| Транскрипсияи баръакс | 55 ℃ | 5 дақиқа | 1 |
| Денатуратсияи ибтидоӣ | 95 ℃ | 5 с | 1 |
| Денатуратсия | 95 ℃ | 3 с | 43 |
| Табобат / васеъкунӣ | 60 ℃ | 10 с |
Эзоҳҳо:
а.Ҳарорати транскрипсияи баръакс аз 50 ℃ то 60 ℃ аст, баланд бардоштани ҳарорат ба тақвият додани сохторҳои мураккаб ва қолибҳои баланди мундариҷаи CG кӯмак мекунад;
б.Ҳарорати оптималии табобатро дар асоси арзиши Tm-и праймер танзим кардан лозим аст ва вақти кӯтоҳтаринро барои ҷамъоварии сигнали флуоресцентӣ дар асоси асбоби PCR Real Time интихоб кунед.
Қайдҳо
Лутфан, барои таъмини саломатӣ ва бехатарии худ, либосҳои шахсии шахсӣ, аз қабили лабораторӣ ва дастпӯшакҳои заруриро пӯшед!
