2 × PCR Super Mix (бо Ранг)
2 × PCR Master Mix дорои Taq DNA Polymerase, dNTPs ва дигар ҷузъҳои барои PCR талабшаванда мебошад.Master Mix бо стабилизаторҳои фармоишии мо барои 3 моҳ дар ҳарорати 4℃ устувор аст.Маҳлули пеш аз омехта барои PCR анъанавӣ оптимизатсия карда шудааст ва бо илова кардани қолаби ДНК ва праймерҳо барои истифода омода аст.Маҳсулоти ПТР-ро мустақиман барои электрофорез бо ранги кабуди бромофенол бор кардан мумкин аст.Маҳсулоти пурқувватшуда дорои протрузияи 3'-dA мебошанд ва ба осонӣ ба вектори Т клон карда мешаванд.2×PCR Master Mix раванди PCR-ро содда мекунад ва ифлосшавиро кам мекунад.
Шароити нигоҳдорӣ
Маҳсулот бояд дар -25℃ ~ -15 ℃ барои 2 сол нигоҳ дошта шавад.
Мушаххасоти
Вафодорӣ (бар зидди Taq) | 1× |
Оғози гарм | No |
Аз ҳад зиёд | 3 '-А |
Полимераз | Так ДНК полимераза |
Формати реаксия | SuperMix ё Master Mix |
Суръати реаксия | Стандарт |
Навъи маҳсулот | PCR Master Mix (2х) |
Дастурҳо
1.Системаи реаксия
Компонентхо | Ҳаҷм(мкЛ) |
Шаблон ДНК | Муносиб |
Пример 1 (10 мкмоль/л) | 2 |
Пример 2 (10 мкмоль/л) | 2 |
2 × PCR Master Mix | 25 |
ДД2O | ба 50 |
2.Протоколи тақвият
Қадамҳои даврӣ | Ҳарорат (°C) | Вақт | Сиклҳо |
Денатуратсияи ибтидоӣ | 94 | 5 дақиқа | 1 |
Денатуратсия | 94 | 30 сония | 35 |
Табобат | 50-60 | 30 сония | |
Васеъ | 72 | 30-60 сек/кб | |
Тамдиди ниҳоӣ | 72 | 10 дақиқа | 1 |
Шарҳ:
1) Истифодаи Шаблон: 50-200нг ДНК геномӣ;0,1-10нг ДНК плазмидӣ.
2) Mg2+консентратсияи: Ин маҳсулот дорои 3mM MgCl2, мувофиқ барои аксари аксуламалҳои PCR.
3) Ҳарорати тозакунӣ: Лутфан ба арзиши назариявии Tm-и праймерҳо муроҷиат кунед.Ҳарорати тозакунӣ метавонад аз арзиши назариявии праймер то 2-5 ℃ пасттар бошад.
4) Вақти дарозкунӣ: Барои муайянкунии молекулавӣ 30 сония/кб тавсия дода мешавад.Барои клонкунии генҳо 60 сония/кб тавсия дода мешавад.
Қайдҳо
1.Маҳсулоти PCR бо 2× PCR Master Mix барои электрофорези гели полиакриламид мувофиқ нестанд.
2.Барои бехатарӣ ва саломатии худ, лутфан куртаҳои лабораторӣ ва дастпӯшакҳои якдафъаинаро барои амалиёт пӯшед.
3.Он ТАНҲО барои истифодаи тадқиқот истифода мешавад!