Multiplex qPCR Probe Premix
Гурба №: HCB5051A
TaqMan multiplex qPCR Master Mix (Dye Based) як ҳалли пешакии 2 × амплификатсияи миқдории PCR дар вақти воқеӣ мебошад, ки бо ҳассосият ва хосияти баланд тавсиф мешавад, ки ранги кабуд дорад ва таъсири иловаи намуна дорад.Ин маҳсулот реагенти 2 × омехтаи пешакӣ омехташуда мебошад, ки имкон медиҳад то чор реаксияи миқдорӣи флюоресцентии PCR дар як чоҳи реаксия.Ин маҳсулот дорои усули аз ҷиҳати генетикӣ тағирёфтаи антитело барои оғоз кардани ферментҳои Taq мебошад, ки ҳассосият ва хосиятро ба таври назаррас беҳтар мекунад.Ҳамзамон, ин маҳсулот буфери бисёр реаксияро амиқ оптимизатсия кардааст, ки метавонад самаранокии пурқувваткунии реаксияро беҳтар кунад ва ба пурқувваткунии самараноки қолибҳои консентратсияи паст мусоидат кунад.Ин маҳсулот метавонад барои генотипсозӣ ва таҳлили мултиплексии миқдорӣ истифода шавад.
Мушаххасот
| Оғози гарм | Оғози гарми дарунсохт |
| Усули ошкор | Муайянкунии праймер-зонд |
| Усули PCR | qPCR |
| Полимераз | Так ДНК полимераза |
| Навъи намуна | ДНК |
Шароити нигоҳдорӣ
Маҳсулот бо яхи хушк фиристода мешавад ва мумкин аст дар -25 ~ -15 ℃ барои 2 сол нигоҳ дошта шавад.
Дастурҳо
1. РеаксияСистема
| Компонентхо | Ҳаҷм (мкл) | Консентратсияи ниҳоӣ |
| 2 × TaqMan multiplex qPCR Master Mix | 12.5 | 1× |
| Омехтаи праймер (10 мкмоль/л) a | × | 0,1 - 0,5 мкмоль/л |
| Омехтаи зонд (10 мкмоль/л)b | × | 50 - 250 нмол/л |
| Ранги истинод ба Rox | 0,5 | 1× |
| Шаблон DNA/cDNA | 1-10 | - |
| ДД2O | то 25 | - |
Эзоҳҳо:Пеш аз истифода бодиққат омехта кунед, то аз ларзиши шадид футури аз ҳад зиёдро пешгирӣ кунед.
а.Консентратсияи Primer: Mix Primer якчанд ҷуфтҳои праймерҳоро дар бар мегирад, одатан ҳар як праймер дар консентратсияи ниҳоии 0,2 мкмоль/л ва инчунин метавонад аз 0,1 то 0,5 мкмоль/л мувофиқ бошад.
б.Консентратсияи зонд: Миксҳои зонд дорои якчанд зондҳо бо сигналҳои флуорессенси гуногун мебошанд ва консентратсияи ҳар як зондро мувофиқи вазъияти мушаххас аз 50 то 250 нмол/л танзим кардан мумкин аст.
1.Истинод оид ба рангҳои Rox: Он дар асбоби пурқувваткунии PCR дар вақти воқеӣ, ба монанди Applied Biosystems барои ислоҳи хатои сигнали флуорессенси байни чоҳҳо истифода мешавад;ин маҳсулот истинод ба ранги Rox-ро дар бар намегирад.Агар лозим бошад, Cas # 10200 тавсия дода мешавад.
2.Равиши қолаб: qPCR хеле ҳассос аст ва тавсия дода мешавад, ки қолабро барои истифода ҳал кунед.Агар қолаб маҳлули саҳҳомии cDNA бошад, ҳаҷми қолаб набояд аз 1/10 ҳаҷми умумӣ зиёд бошад.
3.Системаи реаксия: 25μL, 30μL ё 50 μL тавсия дода мешавад, ки самаранокӣ ва такроршавандагии амплификацияи генҳои мақсаднокро таъмин кунад.
4.Омодасозии система: Лутфан дар курсии хеле тоза омода кунед ва маслиҳатҳо ва найҳои реаксияро бе пасмондаи нуклеаза истифода баред;тавсия дода мешавад, ки маслиҳатҳоро бо картриджҳои филтр истифода баред.Аз ифлосшавии салиб ва ифлосшавии аэрозол худдорӣ намоед.
2.Барномаи реаксия
| Қадами даврӣ | Ҳарорат. | Вақт | Сиклҳо |
| Аввалин-денатуратсия | 95 ℃ | 5 дақиқа | 1 |
| Денатуратсия | 95 ℃ | 15 сония | 45 |
| Табобат / васеъкунӣ | 60 ℃ | 30 сония |
Эзоҳҳо:
1.Табобат / васеъкунӣ: Ҳарорат ва вақтро мувофиқи арзиши тарҳрезишудаи Tm танзим кардан мумкин аст.
2.Гирифтани сигнали флуоресцентӣ: Вақти гирифтани сигнали флуоресцентӣ барои асбобҳои гуногуни муайянкунии qPCR лозим аст, гуногун аст, лутфан мувофиқи ҳадди ақали вақт муқаррар кунед.Вақти якчанд асбобҳои умумӣ чунин муқаррар карда мешавад:
20 сония: Applied Biosystems 7700, 7900HT, 7500 Fast
31 сония: Биосистемаҳои амалӣ 7300
32 сония: Applied Biosystems 7500
Қайдҳо
Лутфан, барои таъмини саломатӣ ва бехатарии худ, либосҳои шахсии шахсӣ, аз қабили лабораторӣ ва дастпӯшакҳои заруриро пӯшед!
