Bst 2.0 ДНК Полимераза (Глицерол озод, зичии баланд)
Bst DNA polymerase V2 аз Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I гирифта шудааст, ки дорои фаъолияти 5′→3′ полимеразаи ДНК ва фаъолияти қавии ивазкунии занҷир, аммо фаъолияти 5′→3′ экзонуклеаза надорад.Bst DNA Polymerase V2 барои ҷобаҷогузории ришта, амплификацияи изотермикии LAMP (Ampplification mediated isothermal loop) ва пайдарпайии зуд мувофиқ аст.Ин Bst DNA polymerase V2 қодир аст, ки фаъолияти полимеразаи ДНК-ро дар ҳарорати хонагӣ боздорад, то он метавонад кор карда шавад ва системаи реаксия дар ҳарорати хонагӣ таҳия карда шавад, ҷилавгирӣ аз тақвияти ғайримуқаррарӣ ва баланд бардоштани самаранокии реаксия, ва ин версия метавонад лиофилизатсия карда шавад.Илова бар ин, он қодир аст, ки фаъолияти худро дар ҳарорати баланд озод кунад, бинобар ин зарурати як қадами фаъолсозии алоҳидаро аз байн мебарад.
Компонентхо
| Компонент | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst ДНК полимераза V2 (Бе глицерин) (32U/мкл) | 0,05 мл | 0,25 мл | 2,5 мл |
| Буфери 10×HC Bst V2 | 1,5 мл | 2×1,5 мл | 3×10 мл |
| MgSO4 (100мм) | 1,5 мл | 2×1,5 мл | 2×10 мл |
Барномаҳо
1.Амплификацияи изотермикии LAMP
2.Реаксияи ҷобаҷогузории ягонаи риштаи ДНК
3.пайдарпаии генҳои GC баланд
4.пайдарпайии ДНК сатҳи нанограмма.
Ҳолати нигоҳдорӣ
Интиқол дар зери 0 ° C ва дар -25 ° C ~ -15 ° C нигоҳ дошта мешавад.
Таърифи воҳид
Як воҳид ҳамчун миқдори ферменте муайян карда мешавад, ки дар давоми 30 дақиқа дар ҳарорати 65 ° C 25 нмол dNTP-ро ба маводи ҳалнашавандаи кислота дохил мекунад.
Реаксияи LAMP
| Компонентхо | 25 мкЛСистема |
| Буфери 10×HC Bst V2 | 2,5 мкл |
| MgSO4 (100мм) | 1,5 мкл |
| dNTPs (ҳар кадомаш 10 мм) | 3,5 мкл |
| SYTO™ 16 Сабз (25×)a | 1,0 мкл |
| Омехтаи праймерb | 6 мкл |
| Bst DNA Polymerase V2 (Беглицерин) (32 U/uL) | 0,25 мкл |
| Шаблон | × мкл |
| ddH₂O | То 25 мкл |
Эзоҳҳо:
1) а.SYTOTM 16 Green (25×): Мувофиқи ниёзҳои таҷрибавӣ, рангҳои дигар метавонанд ҳамчун ивазкунанда истифода шаванд;
2) б.Омехтаи ибтидоӣ: бо омезиши 20 μM FIP, 20 µM BIP, 2.5 µM F3, 2.5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB ва ҳаҷмҳои дигар ба даст оварда шудааст.
Реаксия ва шароит
1 × HC Bst V2 Buffer, ҳарорати инкубатсия аз 60°C то 65°C аст.
Инактиватсияи гармӣ
80°C, 20 дақиқа.
