Reagent Release Намуна
Reagent Sample Release барои сенарияҳои ташхиси молекулавии POCT мебошад.Барои ду системаи амплификацияи мустақими LAMP ва амплификацияи мустақими PCR, барои истихроҷи кислотаи нуклеинӣ лозим нест.Лизати хоми намунаро мустақиман тақвият додан мумкин аст, гени мақсаднокро дақиқ муайян кардан мумкин аст, вақти муайянкунии намунаро боз ҳам кӯтоҳ кардан мумкин аст, ки ба талаботи татбиқи POCT молекулавӣ комилан мувофиқат мекунад.Он барои тампонҳои бинӣ, тампонҳои гулӯ ва дигар намудҳои намуна мувофиқ аст.Намунаҳои коркардшударо мустақиман барои муайянкунии миқдории флюоресцентии PCR ё LAMP дар вақти воқеӣ истифода бурдан мумкин аст ва ҳамон натиҷаҳое, ки усулҳои истихроҷи анъанавӣ бидуни амалиёти мураккаби истихроҷи кислотаи нуклеинӣ ба даст оварда мешаванд.
Шароити нигоҳдорӣ
Дар ҳарорати хонагӣ интиқол ва нигоҳ доред.
Назорати сифат
Муайянкунии функсионалӣ - qPCR-и миқдорӣ: Системаи реагенти намунавии 800μl пурқувват карда шуд
бо 1000 нусха Novel Pseudovirus, як намунаи тампони бинӣ, ки дар натиҷа каҷҳои шабеҳи тақвият ваҚиматҳои ΔCt дар ҳудуди ± 0,5 Ct.
Тартиби таҷрибавӣрес
1. Реагенти 800 мкл намуна гиред ва маҳлули лизисро ба найчаи намунагирии 1,5 мл паҳн кунед.
2. Тампончаи биниро ё гулӯро бо тампон гиред; Тартиби гирифтани тампони биниро: тампони хушкидаро гирифта, ба сӯрохиҳои бинӣ гузоред, оҳиста-оҳиста ба чуқурии тақрибан 1,5 см ҳаракат кунед, 4 маротиба нисбат ба луобпардаи бинӣ зиёда аз 15 сония гардед. , сипас ҳамон амалиётро дар холигоҳи бинии дигар бо ҳамон тампон такрор кунед. Тартиби гирифтани намунаи тампони гулӯ: тампони хушкидаро гирифта, нармкорона 3 маротиба бодомакҳои ҳалқ ва девори ҳалқи пушти ҳалқро зуд хушк кунед.
3.Тампонро фавран ба найчаи намуна гузоред.Сари тампон бояд гардиш карда шавад ва дар маҳлули нигоҳдорӣ на камтар аз 30 сония омехта карда шавад, то боварӣ ҳосил шавад, ки намуна дар найчаи намунагирӣ пурра элюта мешавад.
4. Инкубатсия дар ҳарорати хонагӣ (20 ~ 25 ℃) барои 1 дақиқа, омодасозии буфери лизис анҷом ёфт.
5. Ҳарду системаи 25μl RT-PCR ва RT-LAMP бо миқдори 10μl илова кардани қолаб барои таҷрибаҳои ошкор мувофиқ буданд.
Қайдҳо
1. Ҳадди ақали миқдори лизати мустақими намунавӣ, ки ба як тампончаи ягона мувофиқ аст, мумкин аст ба 400μl танзим карда шавад, ки онро мувофиқи эҳтиёҷоти санҷиш танзим кардан мумкин аст.
2. Пас аз коркарди намуна аз ҷониби реагенти барориши намуна, тавсия дода мешавад, ки марҳилаи навбатии санҷиш ҳарчи зудтар гузаронида шавад, вақти интизории фосилавӣ беҳтараш камтар аз 1 соат аст.
3. РН-и лизати намуна туршӣ аст ва системаи муайянкунӣ бояд буфери муайян дошта бошад.Он барои аксари муайянкунии флуорессенси PCR, RT-PCR ва LAMP бо буфери pH мувофиқ аст, аммо барои муайянкунии колориметрии LAMP бе буфер мувофиқ нест.
