Hotstart Taq DNA Polymerase (5u/ul)
Так ДНК Полимераза як полимеразаи гарми ибтидоии ДНК мебошад, ки бо дучандон басташавии дукарата аз ҷониби антителоҳо. Ин маҳсулот на танҳо фаъолияти полимеразии 5′→3′ полимерази Так ДНК-ро маҳкам мекунад, балки фаъолияти 5′→3′эконуклеазаро низ блок мекунад.Дар давоми 30 сония гарм кардан дар ҳарорати пеш аз денатуратсия метавонад антителоро комилан ғайрифаъол кунад ва фаъолияти полимеразаи ДНК ва фаъолияти экзонуклеазаро озод кунад.Хусусияти бастабандии дукарата метавонад на танҳо амплификацияи ғайримуқаррариро, ки дар натиҷаи номувофиқӣ ё димери праймер ба вуҷуд омадааст, ба таври муассир пешгирӣ кунад, балки инчунин коҳиши сигнали флуоресцентро, ки дар натиҷаи таназзули зонд ба вуҷуд омадааст, бозмедорад, то реагенти ташхиси in vitro ҳангоми интиқол ё истифода дар ҳуҷра устувортар шавад. ҳарорат.
Компонентхо
Компонент | HC1012В (250U) | HC1012В (1000U) | HC1012В (10000U) | HC1012В (25000U) |
Так ДНК полимераза(5 U/мкл) | 50 мкл | 200 мкл | 2 мл | 5 мл |
Ҳолати нигоҳдорӣ
Маҳсулот бо яхи хушк фиристода мешавад ва онро дар -25°C~-15°C барои 2 сол нигоҳ доштан мумкин аст.
Мушаххасоти
Полимераз | Так ДНК полимераза |
Покӣ | ≥ 95% (SDS-PAGE) |
Оғози гарм | Оғози гарми дарунсохт |
Суръати реаксия | Стандарт |
Фаъолияти экзонуклеаза | 5′→3′ |
Дастурҳо
Танзимоти реаксия
Компонентхо | Ҳаҷм (мкЛ) | Консентратсияи ниҳоӣ |
2 × буферa | 25 | 1× |
Омехтаи праймер/пробб | × | 0,1 мкмоль/л-0,5 мкмоль/л |
Hotstart Taq Polymerase (5U/μL) | 1.2 | 0,12 У/мкл |
Шаблон ДНКc | × | 0,1-100 нг |
ДД2O | То 50 | - |
Эзоҳҳо:
1) Мувофиқи барномаи мушаххаси таҷрибавӣ, омода кардани буфери реаксияи мувофиқ лозим аст.
2) Миқдори ДНК ва консентратсияи зондҳо ё праймерҳо консентратсияи тавсияшаванда мебошанд.Консентратсияи оптималиро мувофиқи шароити мушаххаси таҷрибавӣ танзим кардан мумкин аст.
Протоколи гардиши гармидиҳӣ
Қадам | Ҳарорат(°C) | Вақт | Сиклҳо |
Пеш аз денатуратсия | 95 ℃ | 5 дақиқа | 1 |
Денатуратсия | 95 ℃ | 15 сония | 45 |
Табобат / тамдид | 60 ℃а | 30 сонияb |
Эзоҳҳо:
1) Ҳарорати реаксия мувофиқи арзиши Tm-и праймерҳои тарҳрезишуда танзим карда мешавад.
2) Асбобҳои гуногуни qPCR ба вақти гуногуни гирифтани сигнали флуоресцентӣ ниёз доранд, лутфан мувофиқи маҳдудияти кӯтоҳтарин муқаррар кунед.
Қайдҳо
Лутфан, барои таъмини саломатӣ ва бехатарии худ, либосҳои шахсии шахсӣ, аз қабили лабораторӣ ва дастпӯшакҳои заруриро пӯшед!