Алкалинии фосфатаза (ALP)
Тавсифи
Фосфатазаи сілтӣ аз штамми рекомбинатии E. coli гирифта шудааст, ки гени TAB5-ро дорад.Фермент дефосфоризатсияи нӯги 5´ ва 3´ фосфомоноэфирҳои ДНК ва РНК-ро катализ мекунад.Инчунин, он рибоза, инчунин трифосфатҳои дезоксирибонуклеозидро (NTPs ва dNTPs) гидролиз мекунад.TAB5 Фосфатазаи сілтӣ ба нуқҳои 5' барҷаста, 5' дарунрав ва кунд амал мекунад.Фосфатазаро дар бисёр барномаҳои биологияи молекулавӣ истифода бурдан мумкин аст, ба монанди клонкунӣ ё тамғагузории охири зонд барои хориҷ кардани ақсоҳои фосфоризатсияшудаи ДНК ё РНК.Дар таҷрибаҳои клонкунӣ, дефосфоризатсия ДНК-и хатти плазмидиро аз худбасташавӣ пешгирӣ мекунад.Он инчунин метавонад dNTP-ҳои муттаҳиднашударо дар реаксияҳои PCR барои омода кардани қолаб барои пайдарпайии ДНК коҳиш диҳад.Фермент тавассути гарм кардани 70 ° C барои 5 дақиқа комилан ва бебозгашт ғайрифаъол мешавад ва ба ин васила хориҷ кардани фосфатазаро пеш аз бастабандӣ ё тамғагузорӣ нолозим месозад.
Истифода
1.Фосфатазаи алкалинӣ бо сафедаҳо (антителоҳо, стрептавидин ва ғ.) метавонад молекулаҳои ҳадафро мушаххас муайян кунад ва метавонад дар ELISA, БҶ ва ташхиси гистохимиявӣ истифода шавад;
2.Алкалин фосфатаза метавонад барои dephosphorize 5 '-терминали ДНК ё РНК барои пешгирии худпайванд истифода шавад;
3. ДНК ё РНК-и дефосфоришудаи дар боло зикршударо метавон бо фосфатҳои бо тамғаи радиоӣ (тавассути киназаи полинуклеотиди T4) нишонгузорӣ кард.
Сохтори химиявӣ
Мушаххасот
| Ададҳои санҷишӣ | Мушаххасоти |
| Фаъолияти фермент | 5U/мкл |
| Фаъолияти эндонуклеаза | Муайян нашудааст |
| Фаъолияти экзонуклеаза | Муайян нашудааст |
| Фаъолияти никоҳ | Муайян нашудааст |
| Фаъолияти RNase | Муайян нашудааст |
| ДНК E.coli | ≤1нусха/5U |
| Эндотоксин | LAL-Test, ≤10EU/mg |
| Покӣ | ≥95% |
Интиқол ва нигоҳдорӣ
Нақлиёт:Муҳити атроф
Нигоҳдорӣ:Дар ҳарорати 2-8 ° C нигоҳ доред
Санҷиши такрорӣ тавсия дода мешавадҲаёт:2 сол
