RNA интиқолдиҳандаи поли А

Гурба №: HC4001A

Поли А, полиаденилат, омехтаи 100 ~ 10000 полиаденилатҳо мебошад, ки тавассути полинуклеотид фосфорилаза дар vitro полимеризатсия карда мешавад.Дар vivo, поли (а) ба 3-терминали mRNA тавассути фермент барои беҳтар кардани устувории mRNA илова карда мешавад.Ҳангоми истифодаи истихроҷи кислотаи нуклеинӣ, илова кардани поли А ба лизат ё маҳлули ҳатмӣ метавонад ҳосили ДНК ва РНК-ро беҳтар кунад.Механизмаз поли А, ки ҳосили кислотаи нуклеинро беҳтар мекунад, чунин аст:

1. Алоќаи тофта бо адсорбсияи сатњи ашё.Аксари маҳсулоти полипропиленӣ дар рӯи он қувваи статикӣ доранд, ки кислотаҳои нуклеинро адсорб мекунанд.РНК-и интиқолдиҳанда метавонад онҳоро сер кунадтаъсири адсорбсия ва кам кардани талафоти кислотаҳои нуклеинҳои мақсаднок.

2. Нуклеазаҳои микроэлементиро ғайрифаъол кунед: Дар намунаҳои биологӣ нуклеазаҳои гуногун мавҷуданд вамуҳити зист.Poly A метавонад нуклеазаҳои микроэлементҳоро дар марҳилаҳои истихроҷ ё нигоҳдорӣ ғайрифаъол кунадбаланд бардоштани ҳосилнокӣ ва устувории кислотаҳои нуклеинӣ.

3. Копреципитация: Дар марҳилаи тозакунии кислотаи нуклеинӣ бориш ё пайвастшавӣ бо спирт, поли А метавонад бо кислотаи нуклеинҳои мақсаднок якҷоя резад ё заррачаҳои полимериро ташкил кунад, тобарқароршавӣ беҳтар.

Усули истифода

Миқдори мувофиқи хокаи лиофилизатсияшударо гиред, оби коркардшудаи DEPC ё маҳлули намаки гуанидинро илова кунед.онро ба 0,1-1ug/uL гудохта, сипас зери бастабандӣ карда, дар -20°С нигоҳ доред.

Барномаҳо

1.Вирус истихроҷи ДНК/РНК: илова кардани 1-5ug РНК интиқолдиҳанда ба лизат метавонад ҳосили РНК/ДНК-ро беҳтар кунад, кислотаи нуклеинро устувор гардонад ва аз таназзули кислотаи нуклеинҳои тозашуда ҳангоми нигоҳдорӣ пешгирӣ кунад.

2. Дар истихроҷи микроДНК/РНК бо усули мембранаи сутунӣ (<1ug) илова кардани РНК-и интиқолдиҳанда ба 1-5ug барои беҳтар кардани ҳосили кислотаи нуклеинӣ мусоид аст.

3. Дар марҳилаи боришот ва консентратсияи кислотаи нуклеинӣ тавассути спирт, илова кардани РНК-и интиқолдиҳандаи 1-2ug барои беҳтар кардани барқарорсозии РНК сегменти кӯтоҳ муфид аст.

4. Дар маҳлули реаксияи PCR-и миқдорӣ, илова кардани РНК-и интиқолдиҳандаи 10-100нг ба маҳлули реаксия барои беҳтар кардани ҳассосият ва кам кардани C муфид аст._Tарзиш.