Ultra Nuclease GMP-синфи
Гурба №: HC2016A
Дараҷаи UltraNuclease GMP дар Escherichia coli (E.coli) тавассути муҳандисии генетикӣ ва дар муҳити GMP омодашуда ифода ва тоза карда мешавад.Он метавонад часпакии супернатанти ҳуҷайра ва лизати ҳуҷайраро дар таҳқиқоти илмӣ коҳиш диҳад, самаранокии тозакунии сафедаҳоро афзоиш диҳад ва таҳқиқоти функсионалии сафедаро такмил диҳад.Маҳсулот инчунин метавонад боқимондаҳои кислотаи нуклеинии мизбонро ба дараҷаи pg коҳиш диҳад, сифат ва бехатарии маҳсулоти биологии барномаҳоро, аз ҷумла тозакунии вирус, истеҳсоли ваксина ва истеҳсоли фармасевтии сафеда/полисахаридҳоро беҳтар созад.Ғайр аз он, маҳсулот инчунин метавонад барои пешгирии ҷамъшавии ҳуҷайраҳои мононуклеарии хуни инсон (PBMC) дар терапияи ҳуҷайра ва таҳияи ваксина истифода шавад.
UltraNuclease дар шакли реагенти стерилизатсияшуда, ки дар буфер (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% глицерин) бо пайдоиши моеъи беранг ва шаффоф пайдо мешавад, дода мешавад.Ин маҳсулот тибқи талаботи раванди GMP истеҳсол ва дар шакли моеъ таъмин карда мешавад.
Компонентхо
UltraNuclease GMP-синфи (250 U/μL)
Шароити нигоҳдорӣ
Маҳсулот бо яхи хушк фиристода мешавад ва мумкин аст дар -25 ° C ~ -15 ° C барои ду сол нигоҳ дошта шавад.
Агар маҳсулот кушода шуда, дар ҳарорати 4℃ зиёда аз як ҳафта нигоҳ дошта шуда бошад, мо тавсия медиҳем, ки филтр кунедмаҳсулот барои пешгирии ифлосшавии микробҳо.
Мушаххасоти
| Мизбони баён | Recombinant E. coli бо гени UltraNuclease |
| Вазни молекулавӣ | 26,5 кДа |
| нуқтаи электрикӣ | 6.85 |
| Покӣ | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Буфери нигаҳдорӣ | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20mM NaCl, 50% глицерин |
|
Таърифи воҳид | Таърифи як воҳиди фаъолият (U) миқдори ферментест, ки барои он истифода мешавадарзиши азхудкунии ΔA260-ро ба 1,0 дар 30 дақиқа дар 2,625 мл тағир диҳедсистемаи реаксия дар 37℃ бо рН 8,0 (баробар ба ҳазми пурраи37 мкг ДНК нутфаҳои лосос ба олигонуклеотидҳо). |
Дастурҳо
1. Намуна Коллексия
Ҳуҷайраҳои пайваста: миёнаро хориҷ кунед, ҳуҷайраҳоро бо PBS шуста, супернатантро хориҷ кунед.
Ҳуҷайраҳои суспензия: ҳуҷайраҳоро бо центрифуга ҷамъ кунед, ҳуҷайраҳоро бо PBS бишӯед, дар 6000 центрифуга кунедчархзанӣ барои 10 дақиқа, ҷамъ кардани pellet.
Escherichia coli: бактерияҳоро тавассути центрифуга ҷамъ кунед, як маротиба бо PBS бишӯед, дар 8000 центрифуга кунедчархзанӣ барои 5 дақиқа, ва ҷамъ кардани pellet.
2. Табобати намунавӣ
Пелетҳои ҳуҷайраи ҷамъшударо бо буфери лизис дар таносуби масса (г) ба ҳаҷм (мл) 1: (10-20) ё бо усулҳои механикӣ ё кимиёвӣ дар ях ё дар ҳарорати хонагӣ коркард кунед (1 г пелети ҳуҷайра тақрибан тақрибан
109 ҳуҷайра).
3. Табобати ферментҳо
Ба системаи реаксия 1-5мМ MgCl илова кунед ва рН-ро ба 8-9 танзим кунед.
UltraNuclease-ро мувофиқи таносуби 250 воҳид барои ҳазм кардани 1 г донаҳои ҳуҷайра илова кунед, дар ҳарорати 37 ℃ зиёда аз 30 дақиқа инкубатсия кунед.Лутфан ба шакли "Вақти реаксияи тавсияшаванда" муроҷиат кунед, то интихоб кунеддавомнокии табобат.
4. Supernatant Коллексия
Дар 12,000 чархзанӣ барои 30 дақиқа центрифуга кунед ва супернатантро ҷамъ кунед.
Эзоҳ: Агар маҳлул туршӣ ё сілтӣ бошад ё дорои консентратсияи баланди намак, шустушӯй ёДенатурантҳо, лутфан миқдори ферментро зиёд кунед ё вақти табобатро мувофиқи он дароз кунед.
Ҳолати реаксияи тавсияшавандаон
| Параметр | Ҳолати оптималӣ | Шароити муассир |
| Mg² + Консентратсияи | 1-5 мм | 1-10 мм |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Ҳарорат | 37℃ | 0-42℃ |
| Консентратсияи DTT | 0-100 мм | >0 мм |
| Консентратсияи Меркаптоэтанол | 0-100 мм | >0 мм |
| Консентратсияи катионҳои моновалентӣ | 0-20 мм | 0-150 мм |
| Консентратсияи фосфат лон | 0-10 мм | 0-100 мм |
Тавсия дода мешавад Реаксия Вақт (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Миқдори Ultranuclease (консентратсияи ниҳоӣ) | Вақти реаксия |
| 0,25 У/мл | >10 соат |
| 2,5 У/мл | >4с |
| 25 У/мл | 30 дақиқа |
Эзоҳҳо:
Лутфан, барои таъмини саломатӣ ва бехатарии худ, либосҳои шахсии шахсӣ, аз қабили лабораторӣ ва дастпӯшакҳои заруриро пӯшед!
