Ранс А
Рибонуклеаза A (RNaseA) як полипептид якқатор аст, ки дорои 4 пайванди дисульфидӣ бо вазни молекулавии тақрибан 13,7 кДа мебошад.RNase A эндорибонуклеаза аст, ки махсусан РНК-и якқаторро дар пасмондаҳои C ва U вайрон мекунад.Махсусан, ҷудошавӣ пайванди фосфодиэстериро, ки аз 5'-рибозаи нуклеотид ва гурӯҳи фосфатҳо дар 3'-рибозаи нуклеотиди пиримидини ҳамсоя ба вуҷуд омадаанд, эътироф мекунад, то фосфатҳои 2,3'-сиклӣ ба 3-и мувофиқ гидролиз шаванд. 'фосфатҳои нуклеозид (масалан, pG-pG-pC-pA-pG аз ҷониби RNase A ҷудо карда мешавад, то pG-pG-pCp ва A-PG тавлид кунад).RNase A дар ҷудо кардани РНК-и якқатор фаъолтарин аст.Консентратсияи тавсияшудаи корӣ 1-100 μ Г/мл мебошад, ки бо системаҳои гуногуни реаксия мувофиқ аст.Консентратсияи пасти намак (0-100 mM NaCl) метавонад барои буридани РНК-и якқатор, РНК-и дуқатор ва занҷирҳои РНК, ки дар натиҷаи гибридизатсияи РНК-ДНК ба вуҷуд омадаанд, истифода шавад.
Аммо, дар консентратсияи баланди намак (≥0,3 М), RNase A танҳо РНК-и якқаторро ҷудо мекунад.
RNase A маъмулан барои хориҷ кардани РНК ҳангоми тайёр кардани ДНК плазмидӣ ё ДНК геномӣ истифода мешавад.Новобаста аз он ки DNase дар ҷараёни омодагӣ фаъол аст ё не, метавонад ба реаксия ба осонӣ таъсир расонад.Усули анъанавии ҷӯшондан дар ванна об метавонад барои ғайрифаъол кардани фаъолияти DNase истифода шавад.Ин маҳсулот дорои DNase ва протеаз нест ва пеш аз истифода коркарди гармиро талаб намекунад.Илова бар ин, ин маҳсулот инчунин метавонад дар таҷрибаҳои биологияи молекулавӣ, ба монанди таҳлили муҳофизати RNase ва таҳлили пайдарпаии РНК истифода шавад.
Шароити нигоҳдорӣ
Маҳсулот бояд дар ҳарорати -25 ℃ ~ - 15 ℃ барои 2 сол нигоҳ дошта шавад.
Мушаххасоти
| Намуди зоҳирӣ | Хока |
| Миқдор | 100 мг / 1 г |
| Навъи маҳсулот | RNase А |
Дастурҳо
Ин яке аз усулҳои маъмул барои омода кардани маҳлули нигаҳдории RNase A мебошад.Он ҳамчунин метавонад омода карда шавадбо усулҳои дигар мувофиқи усулҳои анъанавӣ дар лаборатория ё адабиёти маълумотӣ (масаланбевосита дар 10 мм Tris-HCl, pH 7.5 ё маҳлули Tris-NaCl гудохта мешавад)
1. Барои тайёр кардани 10 мг/мл маҳлули нигоҳдории RNase A 10 мм ацетати натрийро (рН 5,2) истифода баред.
2. Гарм кардан дар 100 ℃ барои 15 дақиқа.
3. То ҳарорати хонагӣ хунук кунед, 1/10 ҳаҷми 1 М Tris-HCl (pH 7,4) илова кунед, рН-и онро ба 7,4 танзим кунед (барои).мисол, илова 500 мл маҳлули нигаҳдории 10 мг/мл RNase 1 M Tris-HCl, pH7.4).
4. Дар -20℃ барои нигаҳдории яхкардашуда, ки метавонад то 2 сол устувор бошад.
[Эзоҳ]:
Ҳангоми ҷӯшонидани маҳлули RNaseA дар шароити нейтралӣ боришоти RNase ба вуҷуд меояд;Онро дар сатҳи пасти рН ҷӯшонед ва агар боришот вуҷуд дошта бошад, онро мушоҳида кардан мумкин аст, ки метавонад аз мавҷудияти ифлосҳои сафеда бошад.Агар пас аз ҷӯшидани таҳшин пайдо шавад, ифлосҳоро метавон тавассути центрифугаи баландсуръат (13000 rpm) тоза кард ва сипас барои нигаҳдории яхбандӣ зербандбандӣ кард.
Қайдҳо
Лутфан, барои таъмини саломатӣ ва бехатарии худ, либоси шахсии шахсии зарурӣ, аз қабили лабораторӣ ва дастпӯшакҳоро пӯшед.
