2×HiF Taq плюс Master Mix
Гурба №: HCR2014B
HIF Taq plus Master Mix (With Dye) як маҳлули барои истифода омодаи 2 × омехтаест, ки дорои Plus HIF DNA Polymerase, dNTPs ва буфери оптимизатсияшуда мебошад.Ду антиденои моноклоналӣ дар ҳарорати хонагӣ, ки фаъолияти полимераз ва 3′→5′экзонуклеазаро бозмедоранд, ба омехтаи мастер барои осон ва хеле мушаххаси Hot Start PCR илова карда мешаванд.Омили васеъшавӣ ба омехтаи мастер илова карда мешавад, то ба фермент қобилияти амплификацияи порчаҳои дарозро диҳад, дарозии амплификация метавонад то 13 кб бошад, фермент дорои 5′→3′ полимеразаи ДНК ва 3′→5′ фаъолияти экзонуклеаза, вафодории он нисбат ба полимеразаи Так ДНК 83 маротиба, яъне 9 маротиба аз полимеразаи оддии ДНК аст.Он барои пурзӯр кардани қолибҳои мураккаб мувофиқ аст, маҳсулоти пурқувват як охири кунд аст.
2×HIF Taq plus Master Mix (Бо Ранг) дорои бартариҳои зуд ва осон, ҳассосияти баланд, хосияти қавӣ, устувории хуб ва ғайра мебошад, системаи реаксия танҳо бояд праймерҳо ва қолибҳоро илова кунад ва онро бо ду-касбата тақвият додан мумкин аст. протоколи қадам, содда кардани қадамҳои таҷрибавӣ ва сарфаи вақт.Ин маҳсулот дорои рангҳои индикатори электрофорез мебошад ва маҳсулоти PCR метавонанд бевосита барои электрофорез истифода шаванд.Илова бар ин, маҳсулот инчунин дорои як агенти махсуси муҳофизатӣ мебошад, то омехтаи мастер метавонад фаъолияти мӯътадилро пас аз яхбандии такрорӣ нигоҳ дорад.
Шароити нигоҳдорӣ
Маҳсулот бояд дар ҳарорати -25 ~ -15 ℃ барои 1 сол нигоҳ дошта шаванд.
Мушаххасоти
Мушаххасоти маҳсулот | Мастер Mix |
Консентратсияи | 2× |
Оғози гарм | Оғози гарми дарунсохт |
Аз ҳад зиёд | Блант |
Суръати реаксия | Тезкор |
Андоза (Маҳсулоти ниҳоӣ) | То 13кб |
Шароити интиқол | Ях хушк |
Навъи маҳсулот | Премиксҳои баландсифати PCR |
Дастурҳо
1.Системаи реаксияи PCR
Компонентхо | Ҳаҷм (мкл) |
Шаблон ДНК | Муносиб |
Примери пеш (10 мкмоль/л) | 2.5 |
Примери баръакс (10 мкмоль/л) | 2.5 |
2 × HIF Taq плюс Master Mix | 25 |
ДД2O | ба 50 |
2.Истифодаи тавсияшавандаи қолабҳои гуногун
Навъи шаблон | Фрагментҳоро аз 1кб то 10кб васеъ кунед |
ДНК-и геномӣ | 50-200 нг |
Плазмид ё ДНК вирусӣ | 10пг-20нг |
cDNA | 1-2,5 мкл (10% аз ҳаҷми ниҳоии реаксияи PCR зиёд набошад) |
3.Протоколи тақвият
1) Протоколи дуқадам (шаблони мураккаб)
Қадами даврӣ | Ҳарорат. | Вақт | Сиклҳо |
Денатуратсияи ибтидоӣ | 98℃ | 3 дақиқа | 1 |
Денатуратсия | 98℃ | 10 сония | 30-35 |
Васеъ | 68℃ | 30 сония/кб | |
Тамдиди ниҳоӣ | 72℃ | 5 дақиқа | 1 |
2) Протоколи сеқадам (протоколи муқаррарӣ)
Қадами даврӣ | Ҳарорат. | Вақт | Сиклҳо |
Денатуратсияи ибтидоӣ | 98℃ | 3 дақиқа | 1 |
Денатуратсия | 98℃ | 10 сония | 30-35 |
Табобат | 60℃ | 20 сония | |
Васеъ | 72℃ | 30 сония/кб | |
Тамдиди ниҳоӣ | 72℃ | 5 дақиқа | 1 |
3) Протоколи коркарди градиент (шаблони мураккаб)
Қадами даврӣ | Ҳарорат | Вақт | Сиклҳо |
Денатуратсияи ибтидоӣ | 98℃ | 3 дақиқа | 1 |
Денатуратсия | 98℃ | 10 сония | 15 (1 ℃ коҳиш дар як давра) |
Табдилдиҳии градиентӣ | 70-55℃ | 20 сония | |
Васеъ | 72℃ | 30 сония/кб | |
Денатуратсия | 98℃ | 10 сония |
20 |
Табобат | 55℃ | 20 сония | |
Васеъ | 72℃ | 30 сония/кб | |
Тамдиди ниҳоӣ | 72℃ | 5 дақиқа | 1 |
Хусусиятҳо дар доираи протоколҳои гуногуни тақвият
Протокоl | Ду қадам | Се қадам | Табдилдиҳии градиентӣ |
Spec. | зуд | миёна | суст |
Хусусият | баланд | миёна | баланд |
ҳосили PCR | миёна | баланд | миёна |
Сатҳи ошкор | баланд | миёна | баланд |
Қайдҳо
Лутфан, барои таъмини саломатӣ ва бехатарии худ, либосҳои шахсии шахсӣ, аз қабили лабораторӣ ва дастпӯшакҳои заруриро пӯшед!