Маҷмӯаи истихроҷи вируси ДНК/РНК
Маҷмӯа (HC1009B) метавонад аз намунаҳои гуногуни моеъ, аз қабили хун, хуноба, плазма ва тампонҳои шустушӯй кислотаҳои нуклеинии вирусии тозаи баланд (ДНК/РНК) зуд истихроҷ карда, имкон медиҳад коркарди баланди намунаҳои параллелӣ гардад.Маҷмӯа маҳтобҳои магнитии беназири дарунсохташудаи суперпарамагнитии кремнийро истифода мебарад.Дар системаи беназири буферӣ, кислотаҳои нуклеинӣ ба ҷои сафедаҳо ва дигар ифлосиҳо тавассути пайвандҳои гидрогенӣ ва пайвастагии электростатикӣ адсорб мешаванд.Гӯшаҳои магнитие, ки кислотаҳои нуклеинро адсорб кардаанд, барои тоза кардани сафедаҳо ва намакҳои боқимонда шуста мешаванд.Ҳангоми истифодаи буфери камнамак, кислотаҳои нуклеинӣ аз маҳтобҳои магнитӣ озод карда мешаванд, то ба ҳадафи зуд ҷудо ва тоза кардани кислотаҳои нуклеинӣ ноил шаванд.Тамоми раванди амалиёт оддӣ, зуд, бехатар ва самаранок аст ва кислотаҳои нуклеини ба даст овардашударо мустақиман барои таҷрибаҳои поёноб истифода бурдан мумкин аст, ба монанди транскрипсияи баръакс, PCR, qPCR, RT-PCR, RT-qPCR, пайдарпайии насли оянда, таҳлили биочип, ва ғайра.
Шароити нигоҳдорӣ
Дар ҳарорати 15 ~ 25 ℃ нигоҳ доред ва дар ҳарорати хона интиқол диҳед.
Барномаҳо
Хун, хуноба, плазма, элюенти тампон, гомогенати бофта ва ғайра.
Раванди таҷриба
1. Намуна коркард
1.1 Барои вирусҳо дар намунаҳои моеъ ба монанди хун, хуноба ва плазма: 300 мкл супернатант барои истихроҷ истифода мешавад.
2.2 Барои намунаҳои тампон: Намунаҳои тампонро ба қубурҳои намунавӣ, ки дорои маҳлули консервативӣ доранд, ҷойгир кунед, дар тӯли 1 дақиқа гирдоб кунед ва барои экстракция 300 мкл супернатант гиред.
1.3 Барои вирусҳо дар гомогенатҳои бофтаҳо, маҳлулҳои бофтаи бофтаҳо ва намунаҳои муҳити зист: Намунаҳоро барои 5-10 дақиқа нигоҳ доред ва 300 мкл супернатантро барои экстраксия гиред.
2. Тайёр кардани тайёрйреактиви пуркардашуда
Реагентҳои қаблан бастабандишударо аз маҷмӯа бароред, баргардонед ва якчанд маротиба омехта кунед, то маҳтобҳои магнитиро боздоред.Пластинаро оҳиста ҷунбонед, то реактивҳо ва пораҳои магнитӣ ба қаъри чоҳ ғарқ шаванд.Лутфан, самти табақро тасдиқ кунед ва фолгаи мӯҳри алюминийро бодиққат канда гиред.
Δ Ҳангоми канда кардани плёнкаи мӯҳр аз ларзиш худдорӣ кунед, то аз рехтани моеъ пешгирӣ карда шавад.
3. Фаъолияти автоматасбоби атикӣ
3.1 Ба чоҳҳо дар сутунҳои 1 ё 7 аз лавҳаи чуқури 96 300 мкл намуна илова кунед (ба мавқеъи самараноки кори чоҳ диққат диҳед).Ҳаҷми вуруди намуна бо 100-400 мкл мувофиқ аст.
3.2 Пластинкаи чоҳи амиқи 96-чоҳро ба экстрактори кислотаҳои нуклеинӣ гузоред.Остинҳои бари магнитиро пӯшед ва боварӣ ҳосил кунед, ки онҳо чӯбҳои магнитиро пурра фаро мегиранд.
3.3 Барои истихроҷи худкор барномаро ба таври зерин таъин кунед:
3.4 Пас аз истихроҷ, элюентро аз сутунҳои 6 ё 12-и лавҳаи чоҳи амиқи 96 (ба мавқеи самараноки кори чоҳ диққат диҳед) ба найчаи тозаи центрифугаи нуклеазӣ интиқол диҳед.Агар шумо онро фавран истифода набаред, лутфан маҳсулотро дар ҳарорати -20 ℃ нигоҳ доред.
Қайдҳо
Танҳо барои истифодаи тадқиқотӣ.На барои истифода дар расмиёти ташхис.
1. Маҳсулоти истихроҷшуда ДНК/РНК мебошад.Диққати махсус бояд ба пешгирии таназзули РНК аз ҷониби RNase ҳангоми амалиёт дода шавад.Зарфҳо ва намунаҳои истифодашаванда бояд бахшида шаванд.Ҳама қубурҳо ва маслиҳатҳои пипеткаҳо бояд стерилизатсия карда шаванд ва аз DNase/RNase озод карда шаванд.Операторон бояд дастпӯшак ва ниқобҳои бидуни хокаро пӯшанд.
2. Лутфан пеш аз истифода дастури дастурро бодиққат хонед ва мувофиқи дастури дастур амал кунед.Коркарди намуна бояд дар як курсии ултра тоза ё кабинети бехатарии биологӣ анҷом дода шавад.
3. Системаи худкори истихроҷи кислотаи нуклеинӣ бояд бо нури ултрабунафш барои 30 дақиқа пеш аз истифода ва баъд аз истифода безарар карда шавад.
4. Пас аз истихроҷ дар элюент осори маҳтобакҳои магнитӣ боқӣ монда метавонад, аз ин рӯ аз нафаскашии маҳтобҳои магнитӣ худдорӣ намоед.Агар маҳтобҳои магнитӣ аспиратсия карда шаванд, онро бо стенди магнитӣ хориҷ кардан мумкин аст.
5. Агар барои партияҳои гуногуни реагентҳо дастурҳои махсус вуҷуд надошта бошанд, лутфан онҳоро омехта накунед ва боварӣ ҳосил кунед, ки маҷмӯаҳо дар давоми мӯҳлати эътибор истифода мешаванд.
6. Ҳама намунаҳо ва реактивҳоро дуруст партофта, ҳама сатҳҳои корро бо 75% этанол бодиққат тоза кунед ва дезинфексия кунед.
