DNase I (Rnase Free) (2u/ul)
Гурба №: HC4007B
DNase I як эндонуклеазест, ки метавонад ДНК-и якқатор ё дуқабатаро ҳазм кунад.Он метавонад пайвандҳои фосфодиэфириро гидролиз кунад, то моно- ва олигодеоксинуклеотидҳоро, ки дорои гурӯҳи 5'-фосфат ва гурӯҳи 3'-OH мебошанд, ба вуҷуд оранд.Диапазони оптималии рН кории DNase I 7-8 аст.Фаъолияти DNase I аз Ca вобаста аст2+ва метавонад тавассути ионҳои металлии дувалентӣ ба монанди CO фаъол карда шавад2, Мн2+, Зн2+ва гайра Дар хузури Мг2+, DNase Ман метавонам ба таври тасодуфӣ ягон сайти ДНК-и дуқабатаро пора кунам;Дар ҳоле ки дар ҳузури М2+, DNase I метавонам ДНК-ро дар ҳамон макон ҷудо карда, нӯгҳои кунд ё нӯгҳои часпакро бо 1-2 нуклеотид барҷаста ба вуҷуд оранд.Онро барои коркарди намунаҳои гуногуни РНК истифода бурдан мумкин аст.
Компонентхо
| Ном | 1КУ | 5КУ |
| DNaseI рекомбинантӣ (РНаз озод) | 500 мкл | 5 × 500 мкл |
| Буфери реаксияи DNase I (10×) | 1 мл | 5 × 1 мл |
Шароити нигоҳдорӣ
Ин маҳсулот бояд дар -25 ~ -15 ℃ барои 2 сол нигоҳ дошта шавад.Лутфан аз яхбандии такрорӣ худдорӣ намоед.
Дастурҳо
Барои хориҷ кардани ДНК аз намунаҳои РНК танҳо барои истинод истифода мешавад.
1. Лутфан найҳои центрифугаи RNase-ро истифода баред ва нӯги пипеткаҳоро барои омода кардани системаи реаксияи зерин истифода баред:
| Компонентхо | Ҳаҷм (мкл) |
| Буфери реаксияи DNase I (10×) | 1 |
| ДНазели рекомбинантӣ (РНазе) | 1 |
| РНК | X |
| РНаз озод ddH2O | То 10 |
2. Шароити реаксия чунинанд: 37℃, пас аз 15-30 дақиқа, ба консентратсияи ниҳоии маҳлули EDTA 2,5 мм илова кунед ва хуб омехта кунед, баъд 65℃ барои 10 дақиқа.Шаблони коркардшударо барои таҷрибаҳои минбаъдаи RT-PCR ё RT-qPCR ва ғайра истифода бурдан мумкин аст.
Қайдҳо
1. DNase l ба денатуратсияи ҷисмонӣ ҳассос аст;Ҳангоми омехта кардан пробиркаро бодиққат гардонед вахуб ҷунбондан, сахт ҷунбондан.
2. Ҳангоми истифода фермент бояд дар қуттии ях ё дар ваннаи ях нигоҳ дошта шавад ва фавран пас аз истифода дар -20 ℃ нигоҳ дошта шавад.
3. Ин маҳсулот танҳо барои тадқиқот аст.
4. Лутфан, барои бехатарии худ бо куртаҳои лабораторӣ ва дастпӯшакҳои якдафъаина амал кунед.
